色譜柱壽命不理想的問題一直困擾著眾多實驗室的小伙伴們，針對各品牌色譜柱的壽命表現(xiàn)均低于它們的普遍壽命的情況，不少小伙伴紛紛表示其玻璃心不堪色譜柱年輕即逝的打擊。對此，月旭科技為您仔細研究了色譜柱的“長生不老”之術，解決色譜柱壽命不理想的問題，話不多說，快跟隨小編腳步一起往下看吧！

1、樣品組分吸附在色譜柱的前端

a、可能是由于樣品在流動相中的溶解度低而沉淀出來的；

b、樣品中有強保留物質（與鍵合相極性相似的物質）；

c、樣品或者流動相中與填料表面發(fā)生微弱的不可預知的化學反應；

d、樣品溶劑本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近，而且進樣體積較大（內徑4.6mm，上樣體積在 50μl 以上）。

通常這樣的情況伴隨柱壓升高；或者柱壓正常，一個色譜圖中出現(xiàn)有些峰形異常，有些峰形正常的情況。

a、 盡量從根源上解決問題，選擇合適的樣品前處理技術，去除掉強保留物質，獲得更加“干凈”更加成分單一的樣品；

b、 使用保護柱，保護柱的選擇盡量與分析柱同等填料，同等鍵合方法的保護柱，如果使用不同品牌填料、不同裝填工藝的保護柱，在分離能力和保護方面可能得不到更好的效果，也不要使用更大粒徑的保護柱，更大粒徑或者裝填較差的保護柱會因為它的峰展寬作用而導致分離能力下降。

2、流動相“臟”了

流動相在色譜柱中的使用量比樣品要大得多，不停的沖刷色譜柱，如果流動相變質或者有其他的污染物，那對色譜柱的污染會比樣品更大，色譜柱對流動相反而是一種凈化，而且在運行梯度時，還會出現(xiàn)鬼峰。

a、流動相配置后盡快使用，更多不超過 12 小時；

b、有機相和鹽相混合的流動相，更容易導致鹽的析出，盡量使用在線混合，且在運行梯度時變化速率不宜太快，避免鹽析出；

c、用專業(yè)的經過鈍化處理過的溶劑瓶裝流動相，切忌不能使用塑料瓶，做好密封，在更換流動相的時候同時更換試劑瓶；

d、水在接觸空氣或者離開制水設備以后會出現(xiàn)變質，現(xiàn)用現(xiàn)制，打開后盡快使用。

a、流動相中的鹽，尤其是磷酸類的緩沖鹽，對硅膠的攻擊是較強的；

b、高柱溫，加快鹽運動的速率；

c、高氧，流動相中未排除的氧，會加快硅膠內部鍵的斷裂；

d、高pH（＞8），OH 根離子攻擊硅膠內部的 Si-O-Si 鍵，導致硅膠直接破碎；

e、低 pH（＜2），H 根離子攻擊硅膠表面的 Si-C 鍵，鍵合相脫落以后，硅膠裸露出來；

f、高水，也是引起鍵合相水解硅膠裸露的重要誘因。

a、使用鹽的時候，柱溫 ≤30℃；

b、鹽的濃度使用在 50mmol 以下；

c、使用在線脫氣機或者超聲脫氣（10 分鐘，時間太久會發(fā)熱導致流動相成分改變）；

d、除了特殊標注，色譜柱的使用 pH 值在 2-8 之間，如果樣品溶解的 pH 較苛刻，請使用保護柱來抵御 pH 所帶來的損傷，并及時更換；

e、不要把未標注能耐受純水的色譜柱使用在水相大于 95% 的流動相條件下。

本期為您帶來色譜柱的“長生不老”修煉之術上篇，敬請期待下期內容，看色譜柱在“長生不老”路上，如何找到老化原因，并一一解決。