2020-08-12
黃曲霉毒素(AFT)是一類真菌(如黃曲雷和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,其衍生物有約20種,分別命名為B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等,其中以B1的毒性更大,致癌性更強(qiáng)。(歡迎索取紙質(zhì)數(shù)據(jù)。)
黃曲霉毒素主要存在于藥材、谷物、堅(jiān)果、棉籽以及動(dòng)物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。當(dāng)人攝入量大時(shí),可發(fā)生急性中毒,出現(xiàn)急性肝炎、出血性環(huán)死、肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生。當(dāng)微量持續(xù)攝入,可造成慢性中毒,生長(zhǎng)障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。
各級(jí)食品藥品監(jiān)管部門不斷加大中藥生產(chǎn)流通監(jiān)管力度,努力保持中藥質(zhì)量總體穩(wěn)定。
色譜條件
色譜柱:月旭Ultimate? ODS-3 (4.6×300mm,5μm);
流動(dòng)相:甲醇/乙腈/水=300/220/480;
柱溫:30℃;
檢測(cè)波長(zhǎng): 激發(fā)波長(zhǎng):360nm,
發(fā)射波長(zhǎng):450nm;
衍生方法:光化學(xué)衍生;
流速:0.8mL/min;
進(jìn)樣量:25μl。
流動(dòng)相的配置
流動(dòng)相配制:精密量取甲醇300ml、乙腈220ml、超純水480ml,充分混勻后經(jīng)0.45 μm濾膜抽濾,即得。
樣品溶液的制備
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:精密量取黃曲霉毒素混合對(duì)照品溶液(黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2標(biāo)示濃度分別為1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml)1ml,置于20ml容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,搖勻,備用。
混合對(duì)照品溶液:精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1ml,置于25ml容量瓶,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液:取供試品粉末15g,精密稱定,置于均質(zhì)瓶中,加入氯化鈉3g,精密加入70%甲醇75ml。高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000r/min);離心5分鐘(離心速度4000 r/min),精密量取上清液15ml,置于50ml容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,離心10分鐘(4000 r/min),精密量取上清液20ml,通過月旭Welchrom?黃曲霉毒素免疫親和小柱,流速3ml/min,用20ml水洗脫,棄去洗脫液,使空氣進(jìn)入柱子,再用1.5ml甲醇洗脫,收集洗脫液,置于2ml容量瓶,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液,即得。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
分別精密吸取上述混合對(duì)照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl注入液相色譜儀,測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
結(jié)果匯總
中藥中黃曲霉毒素測(cè)定結(jié)果匯總
中藥 品種 | 加標(biāo)水平 | 加標(biāo)回收率(%) | |||
G2 | G1 | B2 | B1 | ||
柏子仁 | B1: 1.0μg/kg B2: 0.3μg/kg G1: 1.0μg/kg G2: 0.3μg/kg | 90.24 | 95.67 | 96.70 | 88.94 |
薏米 | 115.55 | 107.62 | 113.91 | 91.83 | |
檳榔 | 82.03 | 82.26 | 92.86 | 83.64 | |
炒麥芽 | 93.48 | 94.10 | 97.54 | 86.07 | |
大棗 | 97.71 | 106.45 | 109.86 | 103.66 | |
地龍 | 100.63 | 108.59 | 114.85 | 101.98 | |
蓮子 | 103.03 | 112.80 | 112.64 | 106.15 | |
胖大海 | 80.42 | 97.10 | 98.06 | 92.55 | |
全蝎 | 84.51 | 84.83 | 80.69 | 81.11 | |
酸棗仁 | 102.12 | 110.54 | 110.29 | 103.47 | |
蜂房 | 105.65 | 109.05 | 96.05 | 111.00 | |
使君子 | 80.75 | 83.25 | 67.74 | 78.59 | |
桃仁 | 104.66 | 104.33 | 108.96 | 108.23 |