2020-12-22
在雙硫磷的檢測(cè)中,我們進(jìn)行了多種不同提取方法實(shí)驗(yàn)方案探究。
首先我們按標(biāo)準(zhǔn)方法操作:標(biāo)準(zhǔn)中采用豬肉試樣稱取5g,加入25ml乙腈-甲醇混合液(4:1,v/v),超聲20 min。以6000 rpm離心5min,移取上清液于一分液漏斗中。再分別用3×15 mL甲醇洗滌試樣三次,洗液與前述上清液合并于同一分液漏斗中。在上述分液漏斗中加入50 mL硫酸鈉水溶液及25 mL三氯甲烷,振蕩5min,靜置分層后,接下層有機(jī)相,再分別用25 mL三氯甲烷提取兩次,合并三氯甲烷提取液,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上40℃濃縮至干,加入5mL正己烷以溶解殘?jiān)?,待凈化?/p>
SPE柱:月旭Welchrom? Florisil PR,
規(guī)格:4g/12mL。
活化:20mL正己烷,棄去;
上樣:待凈化液全部上樣,棄去流出液;
淋洗:10mL正己烷,棄去流出液;
洗脫:20mL 乙酸乙酯-正己烷(3:7),收集流出液于50mL雞心瓶中;
40℃旋蒸至干,準(zhǔn)確加入1mL正己烷溶解殘?jiān)?,GC-MS檢測(cè)。
但在實(shí)際提取中并未從豬肉提取目標(biāo)物,無回收。
在改進(jìn)提取方法中考慮雙硫磷為有機(jī)磷,所以參考有機(jī)磷的提取方法分別作出以下三種改進(jìn):
方法Ⅰ(參考GB 23200.93-2016):
豬肉試樣稱取5g,加入5ml乙腈,加入20ml丙酮,10g無水硫酸鈉超聲提取20min,6000r/min離心5min,吸取澄清液于濃縮瓶中,殘?jiān)屑尤?0ml丙酮重復(fù)提取1遍,合并提取液,于30℃旋蒸至干,加入5ml正己烷待凈化?;厥章?2%。
方法Ⅱ(參考GB/T 2795-2008):
豬肉試樣稱取5g,加入5ml乙腈飽和正己烷,加入20ml正己烷飽和乙腈,超聲提取20min,6000r/min離心5min,吸取澄清液于濃縮瓶中,殘?jiān)屑尤?0ml正己烷飽和乙腈重復(fù)提取1遍,合并提取液,于30℃旋蒸至干,加入5ml正己烷,待凈化(參考GB/T 23204-2008加入正己烷除油脂),回收率54%。
方法Ⅲ:
豬肉試樣稱取5g,加入20ml乙酸乙酯-環(huán)己烷(1:1)超聲提取20min,6000 r/min離心5min,吸取澄清液于濃縮瓶中,殘?jiān)屑尤?0ml乙酸乙酯-環(huán)己烷(1:1)重復(fù)提取1遍,合并提取液,于30℃旋蒸至干,加入5ml正己烷待凈化,回收率15%。
對(duì)比以上3個(gè)方法發(fā)現(xiàn),方法Ⅰ的加標(biāo)回收率優(yōu)于方法Ⅱ、方法Ⅲ,但依然不夠理想。據(jù)此分析原因發(fā)現(xiàn):
方法Ⅰ中提取液旋蒸溫度為30℃,比原方法(GB 23200.93-2016)的40℃低,但濃縮時(shí)依然存在較為嚴(yán)重的爆沸,導(dǎo)致回收率偏低。
降低濃縮溫度至25℃后,回收率比較理想,得到以下的更終優(yōu)化方法。
樣品提?。?/strong>
豬肉試樣稱取5g(j確至0.1g),加入5mL乙腈,加入20mL丙酮,10g無水硫酸鈉超聲提取20min,6000r/min離心5min,吸取澄清液于濃縮瓶中,殘?jiān)屑尤?0mL丙酮重復(fù)提取1遍,合并提取液,于25℃旋蒸至干,加入5mL正己烷帶待化。
SPE凈化步驟:
SPE柱:月旭Welchrom? Florisil PR,規(guī)格:4g/12mL。
活化:20mL正己烷,棄去;
上樣:待凈化液全部上樣,棄去流出液;
淋洗:10mL正己烷,棄去流出液;
洗脫:20mL 乙酸乙酯/正己烷,收集流出液于50mL雞心瓶中;
40℃旋蒸至干,準(zhǔn)確加入1mL正己烷溶解殘?jiān)?,GC-MS檢測(cè)。
氣相條件
質(zhì)譜條件
色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果如下: