2022-06-23
今天小編再給大家分享一些注意事項(xiàng):
方法調(diào)整 有機(jī)相,pH值,進(jìn)樣量,柱溫等。 有機(jī)相 案例 色譜條件 色譜柱:月旭Ultimate? XB C18(4.6×250,5μm)。 流動(dòng)相:A相:磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.8g/L,磷酸調(diào)整pH=2.5); B相:甲醇/乙腈/四氫呋喃; 檢測(cè)器:280nm; 柱溫:30℃; 流速:1.0ml/min; 進(jìn)樣量:10μL; 樣品溶劑:A相; 樣品溶液:L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺用溶劑配置成濃度均為:0.2mg/mL。 B相:6%乙腈
B相:10%甲醇
B相:2.5%四氫呋喃
討論:在使用相似洗脫能力的有機(jī)相比例的情況下,同時(shí)檢測(cè)L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺4種物質(zhì),常用的甲醇,乙腈,四氫呋喃三種有機(jī)溶劑具有不同的分離結(jié)果,可以根據(jù)表《溶劑的選擇性特征》進(jìn)行篩選。
pH值
討論:針對(duì)于易解離的物質(zhì),不同的pH會(huì)導(dǎo)致物質(zhì)的解離程度不一樣,進(jìn)而引起保留時(shí)間的差異,反相離子對(duì)色譜法中需要物質(zhì)成為統(tǒng)一的解離狀態(tài)。