2022-08-25
酸堿共存的多種化合物的分離,在方法開發(fā)時(shí),經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)酸保留峰型良好時(shí),堿性成分峰型保留不理想,堿性成分保留峰型滿意時(shí),酸性成分的峰型與保留又不理想。在這種情況下,可以選擇離子對(duì)試劑來增加其中酸或堿的保留,再選擇合適的流動(dòng)相pH值及有機(jī)相比例,使所有物質(zhì)均能分離并都有良好的峰型。
案例 壬二酸、苦參堿的分離: 色譜柱:UItimate? Polar RP,4.6×250mm,5μm。
檢測(cè)波長:220nm;
柱溫: 40℃;
流速: 1.0mL/min;
進(jìn)樣量:20μL。
在液相色譜中,pH值對(duì)酸堿成分的保留與峰型有很大的影響,pH降低,酸保留增強(qiáng),堿保留減弱;反之,隨著pH值增大,酸保留減弱,堿保留增強(qiáng)。因此對(duì)于酸堿樣品,選擇合適的pH值至關(guān)重要。 在這個(gè)案例中,壬二酸為酸性成分,苦參堿為堿性成分,三氟乙酸具有弱離子對(duì)效果,可以適當(dāng)增加苦參堿的保留。而0.1%三氟乙酸的pH在2.0-2.5之間,壬二酸在酸性條件下保留較強(qiáng),采用梯度洗脫的方式,使兩個(gè)成分的峰型和保留均能達(dá)比較滿意的峰型與保留。