2022-09-23
問
實驗室配置了GPC,有什么用呢?
答
樣品的性質(zhì)不同,對應(yīng)的分離原理不同,如果前處理過程中增加GPC,等于增加了分離或凈化的過程。
在對各類食品、農(nóng)產(chǎn)品、水產(chǎn)品和中藥材中的農(nóng)殘、半揮發(fā)性有機物分析時,樣品中一般會含有大分子物質(zhì)(如色素、油脂等),如果不去除這些物質(zhì),會影響更終的分析結(jié)果及色譜柱的使用壽命。 問 21世紀(jì)什么更貴? 答 時間。 針對此問題,在農(nóng)殘、半揮發(fā)性有機物的樣品分析前,必須進(jìn)行有效的凈化前處理。如果實驗室中有GPC那就事半功倍了。接下來我們不妨了解一下GPC在液相中的應(yīng)用。 GPC的分離原理 一種含有不同分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時,各分子在柱內(nèi)同時進(jìn)行著兩種不同的運動:垂直向下運動和無定向的擴(kuò)散運動。 大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。 小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,即進(jìn)入凝膠相內(nèi),在向下移動的過程中,從一個凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒,如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子更小的更后流出。 GPC的作用 ● 凈化樣品,去除樣品中的大分子基質(zhì)或者小分子干擾物質(zhì),凈化后適合采用GC,HPLC,GCMS等儀器的分析,例如食用油中抗氧化劑、多環(huán)芳烴等的測試,須通過凝膠凈化前處理方式去除油脂等干擾物,將待分析物和干擾物分離開。 ● 保護(hù)分析儀器及色譜柱,防止大分子物質(zhì)堵塞后續(xù)分析用色譜柱及儀器。 GPC的應(yīng)用案例 植物油中9種抗氧化劑的測定(凝膠滲透色譜法)。 01、適用范圍 食品中PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG和BHT等九種抗氧化劑的測定。 參考標(biāo)準(zhǔn):《GB 5009.32-2016 食品安全guo家標(biāo)準(zhǔn) 食品中9種抗氧化劑的測定》。 02、原理 油脂樣品經(jīng)有機溶劑溶解后,使用凝膠滲透色譜(GPC)凈化。 03、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置 分別稱取沒食子酸丙酯(PG),叔丁基對苯二酚(TBHQ),去甲二氫愈木創(chuàng)酸(NDGA),叔丁基對羧基茴香醚(BHA),2, 6-二叔丁基-4-羧甲基苯酚(lonox-100),沒食子酸辛酯(OG),2, 6-二叔丁基對甲基苯酚(BHT),沒食子酸十二酯(DG)10mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得1000μg/mL的單標(biāo)。 稱取2, 4, 5-三羧基苯丁酮(THBP)1mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得單標(biāo)100μg/mL。 流動相配制:1L環(huán)己烷和1L乙酸乙酯等比例混勻。 04、提取步驟 精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,以流動相定容至刻度,待凈化。 加標(biāo)過程:精確稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,精確加入0.2mL100μg/mL9種抗氧化劑混標(biāo),以流動相定容至刻度,得加標(biāo)量為20mg/kg,上機濃度為5μg/mL。 05、凝膠色譜凈化條件 GPC譜圖 儀器型號:月旭科技GPC1600凝膠色譜儀。 色譜柱型號:月旭Bio-Beads S-X3凝膠色譜柱,400mm×25mm; 流動相:乙酸乙酯-環(huán)己烷(1:1); 流速:5.0mL/min; 進(jìn)樣量:5.0mL; 收集時間:14-25min; 波長:254nm。 06、液相色譜分析條件 色譜柱:月旭Ultimate? XB-C18,5μm,4.6×250mm。 流動相:A:0.5%甲酸水溶液;B:甲醇; 流速:1mL/min; 進(jìn)樣量:5μL; 柱溫:35℃; 檢測波長:280nm; 梯度洗脫表:見表1。 表1 梯度洗脫表
07、液相色譜圖和加標(biāo)回收率結(jié)果
結(jié)果展示
GPC-1600凝膠色譜儀加標(biāo)回收率匯總表
我們可以看到使用月旭凝膠柱對植物油中9種抗氧化劑凈化提取,回收率80-101%,結(jié)果滿足要求。
產(chǎn)品信息