上一期《色譜法中常用定量方法分享》中小編給大家簡(jiǎn)單介紹了色譜柱法中定量的方法，本期就簡(jiǎn)單給大家介紹一下色譜法中的定性分析。

眾所周知，色譜定性分析就是要確定各色譜峰所代表的化合物。由于各種物質(zhì)在一定的色譜條件下均有確定的保留值，因此保留值可作為一種定性指標(biāo)。各種色譜定性方法都是基于保留值的。但是不同物質(zhì)在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非專屬的。因此僅根據(jù)保留值對(duì)一個(gè)完全未知的樣品定性是困難的。如果在了解樣品的來源、性質(zhì)、分析目的的基礎(chǔ)上，對(duì)樣品組成作初步的判斷，再結(jié)合下列的方法則可確定色譜峰所代表的化合物。

色譜法中定性方法多種多樣，今天就由小編給大家簡(jiǎn)單分享一下色譜法中常用的幾種定性方法。01、標(biāo)準(zhǔn)樣品定性

利用標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)未知化合物定性是較常用的高效液相色譜定性方法。由于每一種化合物在特定的色譜條件下（流動(dòng)相組成、色譜柱和柱溫等相同），其保留值具有特征性，因此，可以利用保留值進(jìn)行定性。如果在相同的色譜條件下，被測(cè)化合物與標(biāo)準(zhǔn)樣品的保留值一致，可以初步認(rèn)為被測(cè)化合物與標(biāo)準(zhǔn)樣品相同。若流動(dòng)相組成經(jīng)多次改變后，被測(cè)化合物的保留值仍與標(biāo)準(zhǔn)樣品的保留值一致，就能進(jìn)一步證實(shí)被測(cè)化合物與標(biāo)準(zhǔn)樣品為同一化合物。

紫外檢測(cè)器是高效液相色譜中使用更廣泛的一種檢測(cè)器。全波長(zhǎng)掃描紫外檢測(cè)器可以根據(jù)被檢測(cè)化合物的紫外光譜圖提供一些有價(jià)值的定性信息。傳統(tǒng)的方法是在色譜圖上某組分的色譜峰出現(xiàn)極大值，即濃度更大時(shí)，通過停泵等手段，使組分在檢測(cè)池中滯留，然后對(duì)檢測(cè)池中的組分進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，得到該組分的紫外可見光譜圖，再取可能的標(biāo)準(zhǔn)樣品按同樣方法處理。對(duì)比兩者光譜圖即能鑒別出該組分與標(biāo)準(zhǔn)樣品是否相同。某些有特殊紫外光譜圖的化合物也可以通過對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)譜圖來識(shí)別。

03、檢測(cè)器的選擇性定性

同一種檢測(cè)器對(duì)不同種類的化合物的響應(yīng)值是不同的，而不同的檢測(cè)器對(duì)同一種化合物的響應(yīng)也是不同的。所以當(dāng)某一被測(cè)化合物同被兩種或兩種以上檢測(cè)器檢測(cè)時(shí)，兩檢測(cè)器或幾個(gè)檢測(cè)器對(duì)被測(cè)化合物檢測(cè)靈敏度比值與被測(cè)化合物的性質(zhì)是密切相關(guān)的，可以用來對(duì)被測(cè)化合物進(jìn)行定性。這是雙檢測(cè)器定性的基本原理。

雙檢測(cè)器體系的聯(lián)接有串聯(lián)聯(lián)接和并聯(lián)聯(lián)接方式。當(dāng)兩種檢測(cè)器中的一種是非破壞型的，可以采用簡(jiǎn)單的串聯(lián)聯(lián)接方式，方法是將非破壞型檢測(cè)器串接在破壞型檢測(cè)器之前。若兩種檢測(cè)器都是破壞型的，需采用并聯(lián)方式聯(lián)接，方法是在色譜柱的出口端連接一個(gè)三通，分別聯(lián)接到兩個(gè)檢測(cè)器上。在高效液相色譜中更常用于定性分析的雙檢測(cè)體系是紫外檢測(cè)器（UVD）和熒光檢測(cè)器（FLD）。

04、脫機(jī)分析定性

如果使用半制備或者制備模式,收集HPLC流出液中的部分液體樣品，這樣就能收集到一定量的純凈分析物，用來做脫機(jī)的結(jié)構(gòu)確定分析實(shí)驗(yàn)。因?yàn)榭捎玫臉悠妨枯^大，因此在線分析的時(shí)間范圍限制就不存在了,脫機(jī)的結(jié)構(gòu)分析常常能為一個(gè)收集到的色譜峰提供確鑿的結(jié)構(gòu)信息。脫機(jī)分析包括傳統(tǒng)的FTR、NMR和質(zhì)譜等分析方法；只要有足夠多的樣品,我們還可以用濕化學(xué)試驗(yàn)、X射線晶體學(xué)或者其他分析技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)脫機(jī)分析。