2023-01-17
你是否還在為傳統(tǒng)柱層析速度慢,不容易測量而煩惱?是否還在為填料裝填不均勻、沒填實而在淋洗過程中出現氣泡而煩惱。那么你有沒有想過嘗試使用快速分離色譜柱(Flash柱)呢?Flash柱相比傳統(tǒng)柱層析更加省時省力省溶劑,而且采用紫外檢測器更容易判斷目標產物。Flash柱正相使用的方法開發(fā)可以基于薄層色譜(TLC)點板結果,只需要下面簡單兩步即可實現!
01、TLC點板
選擇極性和溶解性都較合適的展開劑,使得目標產物的Rf值(比移值=溶質移動的距離/溶液移動的距離)在0.15-0.4之間,同時保證各組分分離度(Rf≥0.1)。這是更難也是更關鍵的一步,通常使用一個由高極性和低極性溶劑組成的混合溶劑,高極性的溶劑還有增加區(qū)分度的作用,一般先采用高極性溶劑/低極性溶劑兩種體積比為1/3的混合溶劑,如果有分離跡象,再調整比例(或者加入第三種溶劑),直到達到更佳效果。可參考下列溶劑極性順序進行展開劑選擇。
水(極性更大)>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇 > 丙酮>二氧六環(huán)>四氫呋喃>甲乙酮>正丁醇>乙酸乙酯>乙醚>異丙醚>二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>氯丙烷>甲苯>四氯化碳>二硫化碳>環(huán)己烷>己烷>庚烷>煤油(極性更小)
02、轉換到Flash硅膠柱
確定薄層點板展開劑比例后,該怎么設定Flash分離方法呢,這里有個經典的方法,線性梯度法:
初始溶劑比例=薄層點板溶劑比例÷4
更終溶劑比例=薄層點板溶劑比例×2
di一部分:初始溶劑比例,走1個柱體積
第二部分:從初始溶劑比例線性增加至更終溶劑比例,走11個柱體積
第三部分:更終溶劑比例,走2個柱體積
過柱子時Rf值大的先出來,Rf值小的后出來!
小伙伴們還在猶豫什么,Flash柱用起來吧!
月旭新一代WelFlash? SiO2 LS正是您分離純化的得力助手。新款中低壓制備柱具有耐壓高、柱效好、耐腐蝕等優(yōu)點。每批制備柱的性能參數都經過精密的控制和嚴格的測試,以確保產品批間具有較高的回收率和較好的重現性。
WelFlash? SiO2 LS柱有以下規(guī)格可供選擇:4g、12g、25g、40g、80g、120g、220g、330g。
產品特點如下:
01 采用優(yōu)質硅膠裝填,金屬雜質含量低、均勻的粒徑分布和孔徑分布、機械強度高,性價比優(yōu)越。
02 優(yōu)化裝填工藝,分離度高,重現性好
03 聚丙烯柱管和接頭采用新型技術設計,更高耐壓200psi,適用于大多數快速色譜儀。
產品規(guī)格及貨號: